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首頁-技術(shù)文章-SEC色譜柱拖尾的原因

SEC色譜柱拖尾的原因

  • 發(fā)表時(shí)間2024-09-19
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Shim-packBio系列SEC色譜柱不僅具有優(yōu)異的穩(wěn)定性,而且對(duì)蛋白等生物樣品的次級(jí)吸附作用非常小,可以獲得穩(wěn)定的批間重現(xiàn)性以及更高的樣品回收率。Shim-packBioDiol系列孔徑分布廣泛,有60Å,120Å,200Å,300Å等多種孔徑選擇,可以應(yīng)對(duì)單克隆抗體,寡核苷酸,蛋白多肽等多種生物技術(shù)藥物聚體或者片段的分離分析。2µm粒徑填料則可以實(shí)現(xiàn)生物藥的快速分離。  
Shim-packBio系列SEC色譜柱拖尾的原因主要包括以下幾個(gè)方面:  
樣品結(jié)構(gòu)復(fù)雜:當(dāng)樣品中存在多種不同大小、形狀或結(jié)構(gòu)的分子時(shí),這些分子可能在色譜柱中以不同速率進(jìn)行分離,導(dǎo)致一些分子在柱中停留時(shí)間較長(zhǎng),從而出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象。  
色譜柱老化:色譜柱的老化或損壞會(huì)導(dǎo)致柱內(nèi)填料的不均勻性,或者色譜柱的分離效果下降,從而影響分離性能,產(chǎn)生拖尾現(xiàn)象。  
柱溫不穩(wěn)定:SEC色譜在進(jìn)行分離時(shí)需要嚴(yán)格控制溫度,如果柱溫不穩(wěn)定或溫度偏高,可能會(huì)導(dǎo)致柱內(nèi)填料的活性降低,也會(huì)引起拖尾現(xiàn)象。  
溶劑選擇不當(dāng):溶劑的選擇對(duì)色譜分離也有很大影響,如果選擇的溶劑不適合樣品的性質(zhì)或色譜柱的填料,可能會(huì)導(dǎo)致拖尾現(xiàn)象的出現(xiàn)。  
操作技術(shù)不當(dāng):操作者在進(jìn)行SEC色譜分析時(shí),如果操作技術(shù)不熟練或者操作不規(guī)范,可能會(huì)引起色譜柱堵塞、柱壓升高等問題,從而導(dǎo)致拖尾現(xiàn)象的發(fā)生。  
針對(duì)以上原因,可以通過檢查色譜柱狀態(tài)、優(yōu)化樣品前處理方法、精確控制色譜條件等措施來減少或解決SEC色譜柱拖尾的問題。

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